Гиполиподемия

Гиполипидемические свойства экстракта мицелия вешенки

В настоящих информационных материалах рассмотрена краткая характеристика стандартизированного экстракта мицелия вешенки (ЭМВ) на основе оригинального, запатентованного штамма гриба (Pleurotus ostreatus 1137) и препаратов на основе ЭМВ.
Представлены результаты экспериментальных исследований, выявивших выраженную гиполипидемическую активностьЭМВ, обеспечивающую снижение содержания в крови холестерина, триглицеридов, липопротеидов низкой и очень низкой плотности в сочетании с повышением содержания липопротеидов высокой плотности.
Показано, что в отличие от традиционных препаратов, применяемых для лечения дислипидемий и коронарного атеросклероза (статины, фибраты) экстракт мицелия вешенки обладает выраженным гепатопротекторным действием. Помимо этого, препарат проявляет антиоксидантную, антиагрегантную, антитромботическую и противовоспалительную активность.
Представлены результаты первых клинических исследований, подтверждающих эффективность ЭМВ при лечении больных с гиперлипидемией II А и II Б типов, больных с метаболическим синдромом, осложнённым стеатогепатитом и стеатогепатозом, больных диабетом 2 типа с нарушениями липидного обмена. Показано, что ЭМВ отличается высоким профилем безопасности. Не было выявлено побочного действия и осложнений.
Публикация предназначена для терапевтов, кардиологов, ангиологов, гастроэнтерологов и врачей других специальностей.

Авторский коллектив:
Засл. деят. науки РФ, д-р техн. наук, проф. В.П. Герасименя,
д-р мед. наук, проф. З.Ш. Голевцова,
кан-т техн. наук С.В. Захаров,
кан-т. техн. наук А.Е. Орлов ,
канд. биол. наук Э.З. Рабинович,
канд. хим. наук А. В. Трезвова,
канд. биол. наук Л. М. Шаповалова

ВВЕДЕНИЕ
Современная фармакология позволяет решать самые серьезные проблемы человеческого здоровья. К сожалению, большинство фармацевтических лекарственных препаратов производится из синтетических субстанций и воспринимается организмом как чужеродные вещества. Следствием этого являются многочисленные побочные явления, в том числе и тяжёлые, опасные для здоровья.
Поэтому все чаще специалисты фармакологи и врачи обращают свое внимание на препараты природного происхождения. Современные высокие технологии, в частности биотехнология, позволяют создавать на основе природных соединений высокоэффективные препараты, сравнимые по своему фармакологическому и лечебному действию с синтетическими фармацевтическими препаратами, но не имеющие выраженных побочных эффектов.
Положительные результаты углублённых экспериментальных и клинических исследований природных препаратов, построенные на принципах доказательной медицины, позволят обеспечить практикующих врачей необходимой профессиональной информацией и методологией для успешного лечения многих заболеваний.
Особое место среди препаратов природного происхождения занимают лечебные средства на основе грибов. Они используются в медицине уже более 2000 лет, т.к. являются источником различных биологически активных веществ (БАВ), в том числе с противоопухолевой, противовирусной, антимикробной и иммуномодулирующей активностью.
Грибы открыли эру антибиотиков в медицине и дали толчок к расцвету незаслуженно забытой фунготерапии. В производстве современных антибиотиков используется более 500 видов грибов.
В настоящее время в России и за рубежом проводятя широкие исследования японских древесных грибов шиитаке(Lentinus edodes), рейши (Ganoderma lucidum) и уже получены сенсационные результаты: открыто новое вещество - лентинан, обладающее выраженным противоопухолевым действием [1].
Источником БАВ, как правило, являются плодовые тела грибов. Однако, в последние годы появились препараты на основе экстрактов из мицелия грибов. Эти экстракты отличаются повышенным содержанием БАВ и более широким их спектром, за счет чего обладают поистине уникальными лечебными свойствами [2].

На основе экстракта из штамма гриба Aspergillus terreus были получены наиболее эффективные в настоящее время гиполипидемические препараты-статины, внёсшие революционный вклад в профилактику и лечение атеросклероза.
Клинические проявления атеросклероза в настоящее время занимают ведущее место в структуре заболеваемости и смертности в экономически развитых странах. Изучение патогенетических механизмов атерогенеза по-прежнему является одной из наиболее актуальных проблем современной биологии и медицины.
На сегодняшний момент хорошо известно, что в развитие атеросклероза вносят вклад различные факторы, в том числе нарушения липидного обмена, гиперфункция свертывающей системы крови, патология метаболизма сосудистой стенки, повышение артериального давления, иммунологические нарушения. Однако, основные успехи в лечении заболеваний, обусловленных атеросклерозом, связаны с внедрением в клиническую практику препаратов, нормализующих метаболизм холестерина (ХС) и липидный обмен. Показано, что начальным этапом формирования атеросклеротических поражений сосудов на клеточном уровне является избыточное накопление внутриклеточных липидов, главным образом, ХС и его эфиров.
Повышенное содержание ХС в крови в сочетании с повышением содержания липопротеидов низкой и очень низкой плотности (ЛПНП и ЛПОНП), а также снижением липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) - один из основных факторов риска в развитии атеросклероза и его основных осложнений, в частности, ишемической болезни сердца (ИБС).
Продолжительные клинические исследования препаратов, понижающих уровень ХС и ЛПНП в крови, показали, что эта терапия дает значительные преимущества при профилактике заболеваемости и смертности от сердечно-сосудистых заболеваний.
На основании мультицентровых клинических исследований было установлено, что нормализация уровня ХС у людей среднего и пожилого возраста существенно уменьшает риск сердечно-сосудистых заболеваний. Так, в исследовании, проведенном в Хельсинки (HHS, 1987), было показано, что понижению на 10% уровня ХС в крови соответствует уменьшение на 30% числа сердечно-сосудистых заболеваний в течение 5 лет. В специальном исследовании (MRFIT, 1990) было показано, что понижение уровня ХС на 10% коррелирует с понижением смертности от сердечных заболеваний на 11,4 % [3].Наиболее эффективными гиполипи-демическими препаратами являются статины (ингибиторы ХС ГМГ-Со А-редуктазы). Снижение смертности от ИБС и риска инфаркта миокарда связывают не только со способностью статинов снижать уровень ХС плазмы, но также с плеотропными эффектами и особенно с противовоспалительным действием. Следует подчеркнуть, что эффект статинов реализуется, главным образом, в клетках печени, т.к. лишь около 5% от введённого препарата попадает в общий кровоток и контактирует с вне-печеночными клетками. Статины на сегодняшний день являются наиболее эффективными средствами, снижающими ХС, липопротеиды низкой (ЛПНП) и очень низкой (ЛПОНП) плотности. Однако, они незначительно повышают содержание Л ПВП и не снижают уровень триглициридов (ТГ) крови [4, 5].
С целью увеличения фармакологической активности фармацевтические компании стали заменять природные статины на их синтетические аналоги и рекомендовать комбинированную терапию статинов с фибратами, что существенно повысило гиполипидемическую эффективность терапии, но и привело к повышению частоты и тяжести побочных эффектов.
Следует отметить, что, прекращение приёма статинов сопровождается «синдромом отмены». При этом содержание ХС и ЛПНП быстро возвращается к исходному повышенному уровню. Поэтому статины рекомендуют принимать фактически постоянно, при необходимости постепенно повышая дозу. Однако, длительный приём повышенных доз статинов может приводить к выраженным побочным эффектам, в том числе и опасным для жизни. Так, действие на печень проявляется существенным повышением уровня трансаминаз крови. При повышении уровня трансаминаз в крови более чем в 3 раза, по сравнению с нормой, терапию прекращают. При приеме статинов возможно повышение билирубина крови. То есть, статины могут оказывать гепатотоксическое действие. Следует отметить, что для препаратов из класса ингибиторов гамма-метил-глютамил-КоА-редуктазы, к числу которых относятся статины, выявлен прооксидантный эффект. Показано, что длительная терапия больных ИБС статинами уменьшает содержание природного антиоксиданта убихинона Q10 [6]. Наличие прооксидантной активности этих препаратов исключает гепатозащитный эффект. Влияние на мышечную систему проявляется повышением в крови уровня креатинфосфокиназы (КФК). Назначение статинов возможно при исходно повышенном уровне КФК в крови не более чем на 20% от нормального уровня. Применение статинов больными с исходными значениями КФК, превышающими этот предел, может сопровождаться клиническими проявлениями в виде повышения чувствительности, слабости и болезненности в мышцах. При комбинированной терапии статинами и фибратами значительно возрастает риск мышечных повреждений, вплоть до случаев распада мышц с появлением миоглобина в моче и развитием острой почечной недостаточности. Миопатия развивается примерно у 1 из 1000 больных, получающих монотерапию статинами. Миопатию диагностируют при появлении болей в мышцах и мышечной слабости на фоне превышения нормального уровня КФК плазмы в несколько раз. Если же она не распознается и терапия статинами не прекращается, может развиться рабдомиолиз и сопутствующая ему острая почечная недостаточность. Рабдомиолиз обусловлен разрушением мышечной ткани и считается самым опасным осложнением при лечении статинами, которое может привести к смертельному исходу [7, 8]. В августе 2001 г. фирма Bayer сняла свой препарат церивастатин (Lipobay) с продажи на фармацевтическом рынке после появления сообщений о 31 случае летального исхода, вследствие выраженного рабдомиолиза на фоне терапии церивастатином.

Таким образом, существует ряд эффективных препаратов, понижающих уровень ХС в крови, однако, в большинстве случаев их использование вызывает различные побочные эффекты.
Учитывая, что такие препараты должны применяться постоянно, этот аспект заслуживает особого внимания. На основании статистических оценок и опросов применение статинов и фибратов в России ограничено из-за боязни их побочного действия. Эти факты вызывают интерес к поиску, разработке и применению новых гиполипидемических препаратов, обладающих высоким профилем безопасности. В последние годы проявляется большой интерес специалистов к активным веществам из высших (медицинских) грибов - базидиомицетов (АВБ). Это обусловлено их выраженной гиполипидемической активностью и высокой безопасностью [9]. Проводятся исследования по изучению механизмов действия АВБ, определяющих гипохолестеринемические и гиполипидемические эффекты АБВ [10]. Выполнены клинические исследования, показавшие эффективность лечения гиперлипидемии АВБ, полученными из культивируемого мицелия базидиомицетов [11].

В последние годы в качестве наиболее перспективного источника эффективных биологически активных веществ рассматривается ЭПО - экстракт, полученный из базидиомицета Pleurotus ostrеatus (Вешенка). Гипохолистериновое, гиполипидемическое, антиатерогенное действие ЭПО выявлено как в экспериментальных, так и в клинических исследованиях [12, 13, 14]. В эксприментальных исследованиях показано, что, в отличие от статинов, основной механизм гипохолистеринового действия ЭПО заключается не в снижении выработки эндогенного холестерина, а в уменьшении абсорбции экзогенного холестерина и увеличении его усвоения клетками [15]. При этом скорость деградации и выведения холестерина в составе хиломикронов и липидов низкой плотности ускоряется на 50 % [16]. Показано также, что ЭПО подавляет продукцию ХС ЛПНП, увеличивая при этом содержание ХС ЛПВП. Особенно важно, что ЭПО существенно снижает содержание в крови и печени триглицеридов [17]. При длительном профилактическом применении ЭПО эффективно предупреждает развитие атеросклероза у экспериментальных животных [18].
Несмотря на проведенные экспериментальные исследования, в которых было выявлено гиперлипидемическое действие АБВ из Pleurotus ostreatus (Вешенка) и определён его механизм, в настоящее время в доступной литературе не представлены клинические исследования готовых лекарственных форм препаратов из мицелия Pleurotus ostreatus (Вешенка), получаемых современными методами, с доказанным терапевтическим действием.
Под руководством профессора Герасименя В.П. разработана и запатентована оригинальная технология получения экстракта мицелия вешенки (Pleurotus ostreatus)(Патент РФ № 2192873 от 20.01.2003 г.). Эффективность и безопасность экстракта была доказана в экспериментах in vitro и in vivo, а также в клинических исследованиях, в которых участвовали больные с гиперлипидемией II А и II Б типа и больные, которым не показаны статины и фибраты: с метаболическим синдромом, осложненным стеатогепатитом и стеатогепатозом и сахарным диабетом 2 типа с явлениями дислипидемии и нарушениями функции печени.
В этих исследованиях выявлено существенное гиполипидемическое действие экстракта мицелия вешенки, сопоставимое со статинами и фибратами. Показано, что приём препарата в течение 1 месяца приводил к нормализации содержания в крови холестерина, липопротеидов низкой и очень низкой плотности. При этом в отличие от статинов, на фоне лечения экстрактом снижался до нормы уровень триглицеридов в крови и повышалось содержание липопротеидов высокой плотности. Важным также является обнаруженный факт отсутствия «синдома отмены». При этом гиполипидемический эффект ЭМВ сохранялся со временем, что позволяет проводить интермитирующую терапию, существенно снижающую вероятность возникновения побочных эффектов и привыкания. Кроме того, обнаружено, что в отличие от статинов и фибратов экстракт оказывает гепатопротекторное действие, снижая повышенные показатели трансаминаз, щелочной фосфатазы, креатинина икреатинфосфокиназы. Были также выявлены плейотропные свойства препарата ЭМВ, проявляющиеся в виде антиоксидантного, антиагрегантного и противовоспалительного действия.
Экстракт мицелия вешенки является основой для производства лечебных препаратов с товарными названиями «ОВО-Д» и «ОВОДОРИН».
Настоящие информационные материалы объединяют сведения о медико-биологических и лечебных свойствах экстракта и препаратах на его основе.

ХАРАКТЕРИСТИКА ЭКСТРАКТА МИЦЕЛИЯ ВЕШЕНКИ
ЭМВ разработан на основе нового штамма гриба Pleurotus ostreatus 1137, найденного в средней полосе России. Экстракт представляет собой гель коричневого цвета с приятным травянисто-медовым вкусом и ореховым запахом, получаемый из мицелия вешенки, культивируемого в регулируемых асептических условиях на жидкой питательной среде при интенсивном аэрировании
Состав геля включает:

углеводы (глюкоза, галактоза, манноза, арабиноза, ксилоза, галактоза, глюкозамин),
аминокислоты ( аспаргин, серин, треонин, глютамин, пролин, глицин, аланин, валин, лейцин, лизин, гистидин, аргинин, цистин, метионин, тирозин, фенилаланин),
жирные кислоты ( С10-С22),
органические кислоты (масляная, молочная, уксусная, яблочная, щавелевая),
витамины (В1, В2, В3, В6, PR D, E, С),
металлы и микроэлементы (натрий, калий, кальций, магний, фосфор, сера, железо, цинк, марганец, медь, алюминий, бор, барий, кремний, стронций, литий),
-воду.

Все эти вещества находятся в природных, естественных соотношениях, что, в значительной степени, определяет высокую биологическую активность препарата по отношению к организму.
Экстракт является основой для производства трех лечебных препаратов для приема внутрь:

1. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЭКСТРАКТА МИЦЕЛИЯ ВЕШЕНКИ.

1.1 Сравнительная оценка гиполипидемической активности препаратов «ОВО-Д» и «ОВОДОРИН»
В данном разделе приведены результаты медико-биологических исследований гиполипидемической активности двух препаратов на основе экстракта мицелия вешенки в сравнении с препаратом группы статинов «Зокор».
Исследования проведены в Институте медико-биологических исследований и технологий под руководством д.б.н. Перовой Н.В.. В эксперименте было задействовано 60 белых крыс самцов.
Животные в течение 14 дней получали атерогенную диету в результате чего в крови животных наблюдалось повышение содержания общего холестерина в 1,5 раза, триглицеридов в 1,7 раз, атерогенных фракций холестерина в 1,8 раз. Уровень антиатерогенных фракций холестерина снижался на 25%.
Для защиты организма животных от повреждающего действия атерогенной диеты им вводили перорально препараты «Зокор»( симвастатин), ОВО-Д и ОВОДОРИН (сироп) в дозе 8 мг/кг , 50мг/кг и 50 мг/кг, соответственно.
Результаты исследования показали, что препарат Зокор вызывает уменьшение
содержания общего холестерина на 13%, ОВО-Д на 20%, а ОВОДОРИН на 27%.
Уровень триглицеридов снижался на 40%,41% и 47%, соответственно. Содержание холестерина в атерогенных фракциях липопротеидов снизилось на 17% в случае препарата Зокор, на 26% в случае препарата ОВО-Д и на 35% в случае препарата ОВОДОРИН. Все препараты увеличивали содержание холестерина в антиатерогенных фракциях липопротеидов на 14%.
Важной характеристикой липидного обмена является индекс атерогенности, который определяется как отношение количества холестерина в атерогенных фракциях липопротеидов к его количеству в антиатерогенных фракциях.
Используя данный показатель можно сделать следующий вывод по результатам проведенных исследований.
Атерогенная диета увеличивает индекс атерогенности в 2 раза. Препараты Зокор и ОВО-Д снижают его после 10 дней приема на 19% и 32%, соответственно. ОВОДОРИН в этой группе препаратов наиболее эффективен, т.к. снижает индекс атерогенности на 38%.
Таким образом,препараты на основе экстракта мицелия вешенки на модели атерогенеза проявили выраженную гиполипидемическую активность, не уступая по эффективности известному статину - препарату Зокор.

1.2. Изучение гипотензивного действия препарата "ОВОДОРИН".
В МГУ им. М.В.Ломоносова (биологический факультет) был проведен эксперимент, направленный на изучение влияния препарата ОВОДОРИН на показатели артериального давления ( АД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) у животных ( крысы) с нормальным АД и с искусственно развитой гипертонией.
Оказалось, что независимо от исходного значения АД (нормальное или повышенное) ОВОДОРИН снижал величину АД в среднем на 15 единиц при однократном внутривенном введении в дозе 10 мг/кг ( что соответствует 100 мг/сутки для человека). Величина ЧСС при этом возрастала на 18 уд./мин у животных с нормальным АД и на 9 уд/мин. у крыс с повышенным АД.
Далее, у животных с исходно нормальным и повышенным АД медикаментозно вызывали повышение давления, моделируя адреналиновую ( нарушение функции надпочечников) гипертонию. В модели адреналиновой гипертонии введение гипертензивного агента (фенилэфрин) приводило к росту АД в обеих группах животных примерно на 24 единицы. Также наблюдалось снижение ЧСС на 45 уд/мин. и 21 уд/мин. у крыс с исходно нормальным и повышенным АД , соответственно. Четырехразовое внутривенное введение препарата ОВОДОРИН в дозе 10 мг/кг мс интервалом 10-15 минут приводило к восстановлению АД и ЧСС до исходных значений у животных обеих групп.
Таким образом, в остром эксперименте препарат ОВОДОРИН показал терапевтическую значимость при лечении адреналзависимой гипертонии
или, иными словами, гипертонии психо-эмоционального напряжения.
Еще одно исследование было проведено на гипертензивных крысах, в котором препарат ОВОДОРИН вводили внутрижелудочно в течение трех недель в количестве 10 мг/кг.
Длительное введение препарата приводило к достоверному снижению артериального давления, уменьшению реактивности к сосудосуживающим факторам и восстановлению рефлекторной регуляции АД. Был также проведен эксперимент, направленный на изучение комплексного действия гипотензивного агента ( нитропруссид) и препарата ОВОДОРИН. Нитропруссид, оказывая венозорасширяющее действие, вызывал достоверное снижение АД как у нормотензивных, так и у гипертензивных животных. Четырехкратное внутривенное введение препарата ОВОДОРИН не приводило к дальнейшему снижению АД у нормотензивных животных. У гипертензивных животных величина АД дополнительно уменьшилась под влиянием препарата ОВОДОРИН.
Таким образом, препарат усиливает действие гипотензивных препаратов и может быть эффективен при комплексной терапии гипертензий.

1.3. Изучение гепатопротекторного действия ЭМВ.
Исследования фармакологического действия препарата были проведены по широкой программе в ОАО «ВНЦ БАВ», Старая Купавна, Россия. Гепатопротекторное действие экстракта и препарата сравнения Гептрал исследовано в эксперименте на моделях острого гепатита in vivo. Исследования проведены на белых аутбредных мышах и крысах самцах на традиционных моделях гепатита, индуцированного тетрахлорметаном, тетрациклином, этанолом, парацетамолом и Д-галактозамином. Экстракт и препарат сравнения вводили перорально за час до введения гепатотоксина и затем в течение 7-10 дней в дозах 50-100 мг/кг. Оценивали воздействие препаратов по показателю соотношения массы тела и печени, по уровню трансаминаз (АлАТ, АсАТ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), щелочной фосфатазы (ЩФ), липидов и креатинина в сыворотке крови. На всех моделях острого гепатита ЭМВ в дозе 100 мг/кг нормализовал показатели активности ключевых ферментов: АлАТ, АсАТ, ЩФ и ЛДГ, однако, этот эффект не был достигнут при использовании препарата в дозе 50 мг/кг. Коэффициент де Ритиса также приближался к нормальному. При введении экстракта в обеих дозах уровень триглицеридов снижался до уровня контроля (особенно отчетливо на модели этанол-индуцированного гепатита - в 1,9 раза), а показатель креатинина имел тенденцию к снижению. Препарат сравнения Гептрал либо незначительно влиял, либо вообще не оказывал влияния на уровень трансаминаз. В отличие от ЭМВ Гептрал вызывал накопление триглицеридов, уровень которых в 2 раза превышал показатель нормы.

Таким образом, при остром поражении печени разной этиологии экстракт мицелия вешенки обнаруживает отчетливую гепатопротекторную активность, что подтверждается значительным уменьшением (или полным исчезновением) синдрома цитолиза гепатоцитов, нормализацией экскреторной функции печени и липидного обмена. В проведенных экспериментах ЭМВ по терапевтической эффективности превосходит известное гепатозащитное средство Гептрал.

1.4. Изучение противовоспалительной активности ЭМВ.
Противовоспалительная активность экстракта исследована на моделях острого и хронического воспаления in vivo. Исследования проведены на белых аутбредных крысах самцах массой 250 - 300 г. с использованием традиционных моделей воспаления: каррагенин - индуцированного отека лап крыс, адъювантного артрита и оригинальной модели - сефадекс-индуцированного бронхоальвеолита. ЭМВ в дозах 50 и 100 мг/кг вводили внутри-желудочно однократно за 1 час до инъекции каррагенина, либо многократно (в течение 7-14 дней) в случае адъювантного артрита и бронхоальвеолита. В последней модели использовали также ингаляционный путь введения с помощью небуляйзера.
Препарат в дозах 50 и 100 мг/кг существенно тормозил развитие каррагенин-нндуцированного отека лап крыс: дозозависимое торможение отека составило 24% и 51%, соответственно. При хроническом воспалении суставов экстракт проявил умеренную противовоспалительную активность на ранней и поздней фазе воспаления (торможение 31% и 34%, соответственно). На модели бронхоальвеолита ЭМВ при ингаляционном введении в дозе 100 мг/кг нормализовал цитоз за счет увеличения количества макрофагов в БАЛ, не оказывал значимого эффекта на нейтрофильный и лимфоцитарный компоненты воспаления, снижал в 3 - 6 раз относительное и абсолютное количество эозинофилов в БАЛ.
Таким образом, в условиях моделирования острого и хронического воспаления экстракт мицелия вешенки при внутрижелудочном и ингаляционном введении проявляет умеренную противовоспалительную и выраженную противоаллергическую активность.

1.5. Исследование антиоксидантного действия ЭМВ.
Исследованы шесть образцов экстракта мицелия вешенки на содержание антиоксидантов и антирадикальную активность по отношению к перекисным радикалам этилбензола методом хемилюминесценции (ХЛ). Измерения проводили на модели инициированного окисления этилбензола при температуре Т=60°С. В качестве инициатора использовали азо-изобутиронитрил; в качестве активатора свечения - дибромантрацен. Эффективную концентрацию антиоксидантов и их относительную активность определяли кинетическим методом добавок исследуемого образца в модельную реакцию инициированного окисления этилбензола с контролем интенсивности хемилюминесценции. Полученные результаты соотносили с данными известных антиоксидантов: дибунолом, кверцетином, а-токоферолом и его синтетическим аналогом хроманом-С.
Показано, что экстракт мицелия вешенки содержит до 0,5 моль/1 г антиоксидантов и проявляет умеренную антиоксидантную активность, не уступая хроману-С и а-токоферолу, превышая дибунол и кверцетин.

1.6. Исследование антиагрегантного действия препарата ОВО-Д.
Исследования антиоксидантной (антирадикальной) активности проведены в отделе динамики химических и биологических процессов Института химической физики им Н.Н. Семёнова РАН.
Антиагрегатное действие экстракта исследовали с помощью темнопольного микроскопа. Взятую из пальца нативную кровь помещали на предметное стекло и наблюдали перемещение эритроцитарных сладжей, холестериновых включений и других элементов крови.
У больных с клинически подтвержденными высокими значениями вязкости крови движение элементов крови замедленное, эритроцитарные сладжи имеют сложную геометрию. Спустя 30 минут после приема экстракта в нативной крови пациентов наблюдалось заметное увеличение подвижности сладжей, резко снижалась агрегация эритроцитов и повышался цветовой индекс крови. Показано, что прием экстракта в течение 20 дней в дозе 100 мг в сутки приводит к разрушению агрегаций клеток крови.

2. ПРИМЕНЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА МИЦЕЛИЯ ВЕШЕНКИ В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

2.1.Клиническое исследование гиполипидемического действия препарата «ОВО-Д»
Исследования выполнены на базе Научно-исследовательского центра ММА им. Сеченова, в лаборатории клинической фармакологии под руководством д.м.н., профессора А.К. Стародубцева.
Гиперлипидемия (ГЛП) является важнейшим фактором риска в развитии таких заболеваний и осложнений, как ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда, нарушение мозгового кровообращения. Нормализация показателей липидного спектра крови существенно уменьшает частоту возможных осложнений ГЛП, в первую очередь, инфаркта и инсульта, улучшает прогноз у пациентов с заболеваниями сердечно-сосудистой системы.
Цель исследования. Оценка гиполипидемических свойств препарата ОВО-Д у больных с гиперлипидемией II А и II Б типов.
Характеристика пациентов. Под наблюдением находились 14 больных (6 мужчин и 8 женщин), из которых у 9 отмечался II А тип и у 5 — II Б тип гипер-липидемии. Возраст больных - от 29 до 65 лет.
Режим дозирования. Приём препарата: 1 раз в день утром за 20 мин до завтрака по 100 мг геля, предварительно растворённого в 100 мл кипячёной воды. Курс - 30 дней монотерапии.
Результаты исследования.

Применение препарата у больных с НА и МБ типами ГЛП оказывает заметное гиполипидемическое действие, заключающееся в снижении через 4 недели общего холестерина на 20,2%, триглицеридов на 23,3%, холестерина липопротеидов низкой и очень низкой плотности на 29,3%. Отмечена тенденция к повышению антиатерогенных липопротеидов высокой плотности на 20,4%.
Холестериновый коэффициент атерогенности начал снижаться уже через 2 недели, а через 4 недели снизился на 27,9%.

Прием препарата в течение 30 дней не оказал отрицательного влияния на содержание в крови больных уровня биллирубина, АЛТ, АСТ, КФК, ЩФ и глюкозы.
Препарат хорошо переносился больными. Отрицательного влияния на данные общеклинического обследования больных (осмотр, АД, ЭКГ, общий анализ крови, мочи и т.д.) не отмечено.
Препарат обладает последействием. Так, через 4 недели после курса лечения, содержание липидов в сыворотке крови превысило норму, но оставалось достоверно ниже исходных значений до лечения.

2.2. Оценка антиатерогенного действия препарата «ОВО-Д»
Исследования выполнены в НИИ атеросклероза РАЕН под руководством д.б.н. А.Н. Орехова.
Начальным этапом формирования атеросклеротических поражений сосудов на клеточном уровне является избыточное накопление внутриклеточных липидов, главным образом, холестерина и его эфиров. Сыворотки крови людей, страдающих атеросклерозом магистральных артерий или предрасположенных к данному заболеванию, способны вызывать накопление внутриклеточного холестерина в культуре клеток моноцитов-макрофагов человека, то есть обладают атерогенными свойствами. Степень накопления внутриклеточного холестерина в клетках моноцитов-макрофагов человека характеризует атерогенные свойства сыворотки крови.
Цель исследования. Оценить прямое антиатерогенное действие препарата ОВО-Д по изменению атерогенности сыворотки крови больных после его приёма.
Характеристика пациентов. Исследование выполнено на 4-х добровольцах женщинах, возраст 47 - 61 год, без признаков атеросклероза.
Методика исследования. Использовали клеточную модель в виде культуры моноцитов, выделенных из крови добровольцев. Кровь забирали до приема и через 2 и 6 час. после приёма препарата. Атерогенность сыворотки оценивали по степени накопления внутриклеточного холестерина.
Режим дозирования. Препарат принимали однократно по 100 мг, предварительно растворив в 100 мл кипячёной воды, охлажденной до комнатной температуры.

2.3. Изучение гиполипидемического и гепатопротекторного действия препарата «ОВО-Д» у больных с метаболическим синдромом, осложнённым стеатогепатитом и стеатогепатозом
Исследования выполнены на клинической базе Омской Государственной медицинской академии под руководством д.м.н., профессора З.Ш. Голевцовой.
Метаболический синдром (МС) - заболевание, в основе которого лежит наследственно детерминированное нарушение обмена жиров, белков и углеводов. Характеризуется сочетанием артериальной гипертензии, инсулинорезистентности, гиперинсулинемии с висцеральным ожирением, нарушением липидного и углеводного обмена (дислипопротеидемия, хроническая гипергликемия), высоким риском развития атеросклероза, сахарного диабета, стеатогепатита и стеатоза печени и их осложнений (инфаркт миокарда, внезапная смерть, острое нарушение мозгового кровообращения, хроническая почечная недостаточность, цирроз печени
и др.).
При лечении больных с МС нередко возникают сложности, связанные с сочетанием таких нарушений, как гиперхолестеринемия (с увеличением содержания атерогенных фракций липопротеидов низкой и очень низкой плотности и триглицеридов, снижением уровня антиатерогенных липопротеидов высокой плотности) со стеатозом печени и стеатогепатитом, синдромом цитолиза и внутрипеченочного холестаза (гиперферментемия с повышением активности АлАТ, АсАТ, щелочной фосфотазы и ГГТ). Всё это ограничивает назначение статинов и других препаратов, снижающих уровень холестерина, так как может привести к трансформации жирового гепатоза в стеатогепатит и цирроз печени. Более того, применение статинов противопоказано при заболеваниях печени и стойком повышении активности трансаминаз.
Цель исследования. Оценить влияние препарата ОВО-Д на липидный и углеводный обмен, основные клинические и биохимические параметры синдрома цитолиза и внутрипечёночного холестаза и определить возможность оптимизации гиполипидемической терапии.
Характеристика пациентов. В исследование были включены 15 амбулаторных больных с МС в возрасте от 34 до 70 лет, из них 9 мужчин и 6 женщин. У всех больных имело место сочетание абдоминального ожирения, дислипоп-ротеинемии, артериальной гипертензии и нарушений углеводного обмена.
Режим дозирования. Препарат применялся в виде водного раствора (100 мг на 100 мл воды) 1 раз в сутки утром натощак за 1 час до еды. Курс лечения - 21 день у 9 больных и 30 дней у 6 больных.
Результаты исследования.

Использование препарата ОВО-Д у больных с метаболическим синдромом, осложнённым жировым гепатозом и стеатогепатитом, оказывает позитивное влияние на психосоматический статус и гемодинамические показатели (АД, ЧСС).
Позитивные сдвиги липидного спектра крови в виде достоверного снижения уровня общего холестерина, ЛПНП, триглицеридов и увеличения антиатерогенных фракций ХС - ЛПВП выявляются непосредственно после окончания лечения. Отмечена тенденция к нарастанию позитивных сдвигов после окончания лечения, которые достигают своего максимума к 4-ой - 8-ой неделе и сохраняются у некоторых больных в течение 5-8 месяцев после окончания терапии.
Прием препарата в течение 21 и 30 дней не оказывал отрицательного влияния на содержание в крови исследуемых больных общего билирубина, АлАТ, АсАТ, ЩФ и ГТТ, наоборот, у подавляющего большинстваисследуемых больных на фоне монотерапии препаратом ОВО-Д исчезли биохимические признаки синдрома цитолиза и внутрипеченочного холестаза.
Препарат ОВО-Д в рекомендованной суточной дозе хорошо переносился больными, побочных эффектов, аллергических реакций на прием препарата выявлено не было.

2.4. Коррекция состояния больных сахарным диабетом 2 типа.
Исследования выполнены на клинических базах Ижевской Государственной медицинской академии под руководством д.м.н., профессора Л.А. Лещинского.
У больных сахарным диабетом 2 типа наблюдаются нарушения липидного обмена, в частности, повышенный индекс атерогенности отмечали у 50% больных. В ряде случаев выявляются нарушения функции печени. Поэтому применение статинов и фибратов для нормализации липидного обмена ограничено. Основное значение при подборе препаратов для комбинированной терапии больных сахарным диабетом играет их профиль безопасности.
Цель исследования. Оценить влияние препарата ОВО-Д на общее состояние больных, основные показатели сердечно-сосудистой системы, биохимические показатели крови, характеризующие состояние углеводного и липидного обмена, а также гормонального профиля.
Характеристика пациентов и режим дозирования.
Первую группу составили 8 пациентов с сахарным диабетом 2 типа различной степени тяжести, получавшие ОВО-Д в промежутке между приемами пищи (за 1 час до еды), 3 раза в день в дозе 50 мг по следующей схеме: 1 день - 50 мг однократно, 2 день - 50 мг 2 раза в день, остальные 28 дней - 50 мг 3 раза в день. Вторую группу составили 12 пациентов с сахарным диабетом 2 типа различной степени тяжести, получавшие ОВО-Д в дозе 100 мг по следующей схеме: 1 день - 100 мг однократно, 2 день - 100 мг 2 раза в день, остальные 28 дней - 100 мг 3 раза в день. В третьей группе (10 пациентов) проводилась динамическая оценка влияния ОВО-Д на гормональный профиль женщин в возрасте до 35 лет, имеющих в анамнезе воспалительные заболевания репродуктивной системы. Курс составил 1 месяц. Четвёртая группа (10 пациентов) - контрольная, с сахарным диабетом 2 типа была выбрана для оценки сопоставления динамики суточного уровня сахара в крови по отношению к основной II группе.
Результаты исследования.

Проведенные клинические исследования показали, что прием ОВО-Д в дозе 50 мг (I группа) не оказывает достоверного действия по целому ряду биохимических показателей и инструментальных данных: не влияет на показатели центральной гемодинамики и показатели мозгового кровообращения.
ОВО-Д в дозе 100 мг достоверно нормализовал показатели артериального давления, оказывал положительное влияние на показатели липидного и углеводного обмена, не влияя при этом непосредственно на уровень содержания глюкозы в крови в течении дня. Оказывал выраженное противовоспалительное действие.
Курсовое применение препарата женщинами детородного возраста (III группа) оказывало нормализующее воздействие на гормональный статус организма (по данным содержания уровней кортизола, эстрогена и гормонов щитовидной железы).
В течение 2 месяцев наблюдения за больными после отмены препарата отмечали дальнейшее улучшение общего состояния больных, уменьшение выраженности большинства клинических симптомов, нормализацию лабораторных и функциональных показателей.

3. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА МИЦЕЛИЯ ВЕШЕНКИ
На основании проведенного эксперим ентального изучения фармакологической активности и клинических исследований можно рекомендовать применение препарата в качестве средства профилактики и в составе комбинированной терапии при следующих заболеваниях:

Рекомендуемая схема применения препаратов: по 100 мг 1 раз в день или по 50 мг 2 раза в день за 1 час до еды в течение 30 дней, повторные курсы - по показаниям.

Wasser SP. Medicinal mushrooms as a source of antitumor and immunomodulating polysaccharides. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2002, Nov; 60(3): 58-74.
Sarangi I, Ghosh D, Bhutia SK, Mallick SK, Maiti TK. Anti-tumor and immunomodulating effects of Pleurotus ostreatus mycelia-derived Proteoglycans. Int. Immunopharmacol. 2006, Aug; 6(8): 1287-97.
Аронов Д.М. Статины снижают смертность и улучшают течение атеросклеротических заболеваний. 2001, Consilium medicum. Т. 1/N, 10
Forrester JS, Libby P. The inflammation hypothesis and its potential relevance to statin therapy. Am J Cardiol. 2007 Mar 1 ;99(5):732-8. Epub 2007 Jan 10.
Merlin С Thomas, Paul J. Nestel. Management of dyslipidaemia in patients with type 2 diabetes in Australian primary care. Research Med. J. Aust. 2007, Feb 5; 186(3):128-30.
Folkers K, Langsjoen P, Willis R, Richardson P, Xia LJ, Ye CQ, Tamagawa H. Lovastatin decreases coenzyme Q levels in humans. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1990, Nov.; 87(22): 8931-4.
Evans M, Rees A. Effects of HMG-CoA reductase inhibitors on skeletal muscle: are all statins the same? Drug Saf. 2002, 25(9): 649-63.
Thompson PD, Clarkson P, Karas RH. Statin-associated myopathy. JAMA. 2003, Apr. 2; 289 (13): 1681-90.
9. Ли Ква Рен, Васильев А.В., Орехов А.Н., Тертов В.В., Тутельян В.А. Анти атеросклеротические свойства высших грибов (клинико-эксперимен тальное исследование). Вопросы питания. 1989, стр. 16 - 19.
Berger A, Rein D, Kratky E at all. Cholesterol-lovering properties of Ganoderma Lusidum in vitro, ex vivo, and in hamsters and minipigs. Lipids Health Dis. 2004, 3; 2.
Wasser SP, Weis AL. Therapeutic effects of substances occurring in higher Basidiomycetes mushrooms: a modern perspective. Crit. Rev. Immunol. 1999, 19: 65 - 96.
Opletal L, Jahodar L, Chobot V, Zdansky P, Lukes J, Bratova M, Solihova D, Blunden G, Dacce G.G, Patel A.V. Evidence for the anti-hyperlipidaemic activity of the edible fungus Pleurotus ostreatus. Br. J. Biomed. Sci. 1997, Dec; 54(4): 240-3.
Bobek P, Ozdin O, Mikus M. Dietary mushroom (Pleurotus ostreatus) ameliorates atherogenic lipid in hypercholesterolaemic rats. Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 2003, Jul; 30(7): 470-5.
Abrams DI, Aweeka F, Couey P at all. Antihyperlipidemic effect of pleurotus ostreatus in HIV. Int. Jorn. of Med. Mushrooms. 2005, V. 7, Is. 3.
Bobek P, Ozdin L, Kuniak L. Mechanism of hypocholesterolemic effect of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) in rats: reduction of cholesterol absorption and increase of plasma cholesterol removal. Z. Ernahrungswiss. 1994 Mar; 33(1): 44-50.
. Bobek P, Ozdin O, Mikus M. Dietary oyster mushroom (Pleurotus ostreatus)accelerates plasmacholes terolturnoverin hypercholes terolaemic rat. Physiol Res. 1995; 44(5): 287-91.
Bobek P, Galbavy S. Oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) reduces the production and secretion of very low density lipoproteins in hypercholesterolemic rats. Ceska Slov Farm. 1999 Sep; 48(5): 226-30.
Bobek P, Ozdin L. [The oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) effectively prevents the development of atherosclerosis in rabbits]. Z. Ernah-rungswiss. 1996 Sep; 35(3): 249-52.